۷) ml0.7 فاز آلی را به لوله دیگر منتقل کرده و lµ۱۰۰ محلولW/V 3% دی تیونیت سدیم در سود M0.3 به آن می افزاییم.
۸) مخلوط را مدتی شیک می کنیم و سپس آن را به یک کووت (سل) کوارتز منتفل می کنیم.
۹) محلول را به سرعت در محدوده nm384 و nm 460 در مقابل بلانک که حاوی ml0.7 سدیم کلراید M2.5 و µg 100 محلول دی تیونیت سدیم W/V 3% در سود M0.3 است اسکن می کنیم.
جذب پاراکوات از تفاضل جذب در nm460 از جذب در nm397 بدست می آید.
۳-۲۳ مشتق سازی بیشتر:
برای معتبر سازی یا اعتبارسنجی روش و همچنین مشتق سازی که همان اضافه کردن معرف دی تیونیت بود، یک مشتق رنگی ایجاد شد که دارای جذب بیشتر نسبت به جذب ماوراء بنفش خود پاراکوآت دارد. بدین ترتیب حد تشخیص کاهش، و حساسیت روش اندازه گیری پاراکوآت افزایش یافت. سه پارامتر بازیابی(recovery) یا توان بازیافت مجدد ماده اولیه موجود در نمونه، پس از استخراج ، و حد تشخیص,حد اندازه گیری و خطای درون آزمایش تعیین خواهند شد,به این ترتیب که میزان بازیابی این ماده پس از استخراج از کلینوپتیلولایت نیز از طریق اندازه گیری جذب این ماده بعد از استخراج مطالعه خواهد شد. در نهایت پاراکوات با غلظت مشخص به خون کامل اضافه میشود و فرایند استخراج توسط کلینوپتیلولایت بر روی آن انجام میشود.و با یک ترکیب مادله کننده کاتیونی دیگر مقایسه خواهد شد.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

۳-۲۴ استفاده از حلالهای مختلف جهت استخراج پاراکوات از خون:
۱٫متیل ایزوبوتیل کتون
۲٫دی کلرو متان
۳٫سدیم دودسیل سولفات
۴٫هگزان
۵٫تولوئن
۶٫دی اتیل اتر
۷٫دی کلرومتان/ایزوپروپان
۸٫اتیل استات
۹٫اتیل استات ان پروپانول
۱۰٫اتیل استات ایزو پروپانول
۱۱٫متیل ایزو بوتیل کتون ایزوبوتانول
فصل چهارم
نتایج
در فصل سوم در آزمایش جذب محلول های استاندارد پاراکوات دی کلراید در آب مقطر را در طول موج nm 400-200 اندازه گرفتیم.که طول موج حداکثر در nm 257بود. سپس جذب محلولهای استاندارد ۲، ۵، ۱۰ ،۱۵ و۲۰ میکروگرم بر میلی لیتر پاراکوات دی کلراید در آب مقطر رادر طول موج nm 257 اندازه میگیریم تا منحنی کالیبراسیون پاراکوات در آب مقطر را بدست آوریم وسپس جذب این محلولها را بعد از واکنش با معرف دیتیونیت سدیم۰٫۱% در سود ۱ مولار در طول موج ۳۹۴٫۵nm قرائت کردیم تا بتوانیم منحنی استاندارد(کالیبراسیون) پاراکوات دی کلرایددقیق تری ر ارسم کنیم. برای رسم منحنی استاندارد ، غلظت پاراکوات دی کلراید (محور x ها) را در مقابل جذب در طول موج nm394.5 (محور yها) رسم می کنیم.حال از روی اطلاعات بدست آمده منحنی مربوط استاندارد پاراکوات دی کلراید را رسم میکنیم. با توجه به جذب رزین تبادل کاتیونی پروپیل کربوکسیلیک اسید (PCA) و کلینوپتیلولایت در محدوده uv، از منحنی استاندارد پاراکوات دی کلراید مشتق سازی شده با معرف دی تیونیت سدیم در طول موج nm394.5 که جذب بیشتری نسبت به طول موج nm603 داشت، جهت اندازه گیری و بررسی های کمی پاراکوات استفاده می کنیم.

شکل ۴-۱٫ .طیف ماوراء بنفش پاراکوآت با غلظت ۱۰ μg/ml در آب مقطر
شکل ۴-۲٫ .منحنی کالیبراسیون پاراکوات در آب مقطربعد از مشتق سازی با معرف دی تیونیت
شکل ۴-۳ .طیف مرئی پاراکوآت با غلظت ۱۰ μg/ml در معرف دی تیونیت سدیم
شکل ۴-۴٫ منحنی کالیبراسیون پاراکوات در سرم بعد از مشتق سازی با دیتیونیت سدیم در طول موجnm 394.5
شکل۴-۵٫ منحنی کالیبراسیون پاراکوات - دیتیونیت سدیم در طول موجnm630

شکل ۴-۶٫ .طیف مرئی پاراکوآت با غلظت ۲ μg/ml بعد از استخراج از سرم در معرف دی تیونیت سدیم
شکل ۴-۷٫ منحنی پتانسیل زتا ذرات الک شده کلینوپتیلولایت
۴-۹ آزمون آماری:
برای بررسی تفاوت معنی دار بین درصد بازیابی در گروه های آزمایش از تست آماری آنالیز واریانس
یک طرفه (One way ANOVA) استفاده می شود.
برای برسی هموژن بودن واریانسها از تست Leven استفاده میشود.
عملیات آماری با بهره گرفتن از نرم افزارSPSS ورژن ۱۹ صورت میگیرد.
P-Value˂۰٫۰۵ تفاوت معنی دار بین گروه ها را نشان میدهد.
آزمون Leven نشان میدهد که واریانس درون گروه ها هموژن هستند(P-Value=0.670)
آزمایشات اندازه گیری اندازه ذرات کلینوپتیلولایت ،با بهره گرفتن از دستگاه پارتیکل سایز آنالایزرو بررسی
شکل ذرات با بهره گرفتن از میکروسکوپ الکترونی SEM، سطح ویژه ذرات کلینوپتیلولایت، با بهره گرفتن از
دستگاه BET ، وبررسی طیف UV-Visible، به روش اسپکتروفوتومتری،درمرکز پژوهشی علوم و فناوری نانو دانشگاه تهران انجام شدند.
جدول ۴-۱ .جدول مقایسه انواع روش استخراج پاراکوات(اندازه گیری خطاهای درون آزمایش،حد تشخیص،حد اندازه گیری،ودرصد بازیابی)